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發(fā)布日期:2022-05-30 點(diǎn)擊率:64
毛細(xì)管電泳儀(CE)是以毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力;
利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數(shù)差異進(jìn)行分離,是分析科學(xué)繼液相色譜儀之后的又一重大進(jìn)展;
使分析科學(xué)從微升級(jí)進(jìn)入到了納升級(jí)水平,不僅使單細(xì)胞乃至單分子分析成為可能,也使蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子分析有了新的轉(zhuǎn)機(jī)。
由于CE溶質(zhì)區(qū)帶的超小體積的特性導(dǎo)致光程太短,而且圓柱形毛細(xì)管作為光學(xué)表面不夠理想,對(duì)檢測(cè)器靈敏度要求相當(dāng)高,檢測(cè)是CE分析的關(guān)鍵。
小分子檢測(cè):
1、有紫外吸收:
首先選擇二極管陣列檢測(cè)器或UVD。
2、無紫外吸收:
(1)可衍生化:可先采用衍生的方法,再用UVD檢測(cè),如氨基酸和還原性糖等。
(2)不可衍生化:可采用間接紫外法用UVD檢測(cè),也可用電化學(xué)檢測(cè)器檢測(cè)。
3、有熒光或需要高靈敏度檢測(cè):可用LIFD檢測(cè)。
4、需要測(cè)定結(jié)構(gòu)或難以用光學(xué)檢測(cè)器檢測(cè):可用MS檢測(cè)。
大分子檢測(cè):
1、蛋白質(zhì)和核酸:
(1)首先選擇UVD。
(2)需要高靈敏度檢測(cè):可采用柱前或柱上衍生的方法標(biāo)記熒光,再用LIFD檢測(cè)。
(3)需要特異性檢測(cè):可使用特異性熒光探針標(biāo)記后,再用LIFD檢測(cè)。
(4)需要測(cè)定分子量或氨基酸序列:可用MS檢測(cè)。
2、多糖:
(1)含量較高的多糖:可采用末端吸收法用UVD檢測(cè)。
(2)含量較低的還原性多糖:可采用衍生試劑標(biāo)記后,再用LIFD和UVD檢測(cè)。
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