發布日期:2022-05-29 點擊率:45
高效液固色譜儀是利用樣品各組分在固定相和流動相中吸附-解吸作用的差異,使各組分在作相對運動的兩相中反復多次受到吸附-解吸作用而達到相互分離。
主要類型:
液固吸附色譜
1.1分離原理液固色譜是基于各組分吸附能力的差異進行混合物分離的,其固定相是固體吸附劑。
1.2固定相;吸附色譜固定相可以分為極性和非極性兩大類。
1.3流動相;流動相要求:
1.3.1選用的溶劑應當與固定相互不相溶,并能保持色譜柱的穩定性
1.3.2選用的溶劑應有高純度,以防所含微量雜質在柱中積累,引起柱性能的改變。
1.3.3選用的溶劑性能應與所使用的檢測器相匹配,如果使用紫外吸收檢測器,就不能選用在檢測波長下有紫外吸收的溶劑;若使用示差折光檢測器,就不能用梯度洗脫。
1.3.4選用的溶劑應對樣品有足夠的溶解能力,以提高測定的靈敏度。
1.3.5選用的溶劑應具有低的黏度和適當低的沸點。
1.3.6應盡量避免使用具有顯著毒性的溶劑,以保證工作人員的安全
1.4應用:液固色譜是以表面吸附性能力為依據的,所以它常用于分離極性不同低的化合物,也能分離那些具有相同極性基團,但數量不同的樣品。
液液分配色譜
1.1分離原理;分配色譜法的原理與液液萃取相同,都是分配定律。
1.2固定相;分配色譜固定相由兩部分組成,一部分是惰性載體,另一部分是涂漬在惰性載體上的固定液。
1.3流動相;分內色譜中,要求流動相盡可能不與固定液互溶
1.4應用;既能分離極性化合物,又能分離非極性化合物。由于不同極性鍵合固定相的出現,分離的選擇性可得到很好的控制。
鍵合相色譜
1.1分離原理
1.1.1正鍵合相色譜分離遠離:使用的是極性鍵和固定性,溶質在此類固定相上的分離機理屬于分配色譜。
1.1.2反鍵合相色譜分離原理:使用的是極性較小的鍵合固定相,其分離機理可用疏溶劑作用理論來解釋。
1.2固定相;按極性大小可分為非極性、弱極性、極性化學鍵合固定相三種。
1.3流動相
1.3.1正鍵合相色譜中,采用和反相液液分配色譜相似的流動相,流動相的主體成分為己烷或庚烷。
1.3.2反相鍵合相色譜中,流動相采用和反相液液分配色譜相似的流動相,主題為水。
1.4應用
1.4.1正鍵合相色譜法的應用:多用于分離各類極性化合物如染料、炸藥、多巴胺、氨基酸等;
1.4.2反鍵合相色譜法的應用:由于操作簡單,穩定性和重復性好,該方法已成為一種通用型液相色譜分析方法。在生物化學、醫藥研究、食品分析和環境污染分析等多個領域有了很大的應用和發展。
凝膠色譜
凝膠色譜又稱分子排阻色譜,它是按照分子尺寸大小順序進行分離的一種色譜方法。凝膠色譜法的固定相凝膠是一種多孔性的聚合材料,有一定的形狀和穩定性。根據所用流動相的不同,凝膠色譜法可以分為兩類:即用水溶劑做流動相的凝膠過濾色譜法(GFC)與用有機溶劑如四氫呋喃做流動相的凝膠滲透色譜法(GPC)。
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